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產(chǎn)品中心

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細胞平板克隆形成實驗

產(chǎn)品簡介

細胞平板克隆形成實驗是當單個細胞在體外增殖6代以上,其后代所組成的細胞群體,稱為集落或者克隆。每個克隆含有50個以上的細胞,大小在0.3-1.0mm之間。集落形成率表示細胞的獨立生存能力。細胞接種存活率只表示接種細胞后貼壁的細胞數(shù),但貼壁的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆。

產(chǎn)品型號:
更新時間:2023-08-29
廠商性質(zhì):代理商
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應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)

平板克隆形實驗步驟

1、細胞懸液制備:取對數(shù)生長期的單層培養(yǎng)細胞,用0. 25%胰蛋白酶消化并吹打成單個細胞,離后用*培養(yǎng)基重懸,制成細胞懸液。

2、細胞種板:將細胞懸液作梯度倍數(shù)稀釋,以每皿50、100、 200、 500、1000、 2000個細胞的梯度密度分別接種含1 ml 37 C預(yù)熱培養(yǎng)液的皿中,并輕輕轉(zhuǎn)動,使細胞分散均勻。置37 C 5% Co2的環(huán)境下,靜置培養(yǎng)。

3、細胞觀察:顯微鏡下觀察到單個細胞長到20個以上細胞克隆,培養(yǎng)皿中出現(xiàn)肉眼可見的克隆時,終止培養(yǎng)。棄去.上清液,用PBS小心浸洗2次。加純甲醇1ml,固定15分鐘。然后去固定液,加適量Giemsa應(yīng)用染色液染10分鐘,然后用流水緩慢洗去染色液,空氣干燥,手記拍照采集圖像。

4、克隆計數(shù):用肉眼直接計數(shù)克隆數(shù),后計算克隆形成率。

結(jié)果分析

平板克隆克隆形成率=克隆數(shù)接種細胞數(shù)x100%

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