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細胞劃痕實驗

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細胞劃痕實驗是一種操作簡單，經(jīng)濟實惠的研究細胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。這種方法的原理是，當細胞長到融合成單層狀態(tài)時，在融合的單層細胞上人為制造一個空白區(qū)域，稱為“劃痕“。劃痕邊緣的細胞會逐漸進入空白區(qū)域使“劃痕“愈合。

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更新時間：2023-08-28

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細胞劃痕實驗是一種簡單易行的檢測細胞運動的方法，實驗成本低，可以用來檢測貼壁生長腫瘤細胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。

細胞劃痕實驗是一種操作簡單，經(jīng)濟實惠的研究細胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。這種方法的原理是，當細胞長到融合成單層狀態(tài)時，在融合的單層細胞上人為制造一個空白區(qū)域，稱為“劃痕"。劃痕邊緣的細胞會逐漸進入空白區(qū)域使“劃痕"愈合。

基本步驟：“劃痕"的制造，細胞遷移期間圖像的獲得以及后期數(shù)據(jù)的處理。

步驟	一.準備：能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min（超凈臺內(nèi)）二.流程： 1.先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻得劃橫線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。 2.在空中加入約5X10⁵個細胞，具體數(shù)量因細胞不同而不同，掌握為過12小時能鋪滿。 3.第二天用槍頭比著直尺，盡量垂至于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不能傾斜。 4.用PBS洗細胞3次，去處劃下的細胞，加入無血清培養(yǎng)基。 5.放入37度5%CO₂培養(yǎng)箱，培養(yǎng)。按0，6，12，24小時取樣，拍照。

特點：1，在程度上模擬了體內(nèi)細胞遷移的過程。
2, 非常適合研究細胞與胞外基質(zhì)（ECM），細胞與細胞之間相互作用引起的細胞遷移。
3，與包括活細胞成像在內(nèi)的顯微鏡系統(tǒng)兼容，可用于分析細胞間的相互作用。
4，研究細胞遷移的體外實驗中簡單的方法。

傳統(tǒng)方法：細胞融合后，用槍頭在細胞層表面制造劃痕
方法缺陷：人工制造的“劃痕"很難*性，重復(fù)性差。