上海穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建

一、詳細(xì)介紹
        上海穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類，一類是是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中、雖然可以達(dá)到高水平的表達(dá)，但通常只持續(xù)數(shù)天，在轉(zhuǎn)染后24-72小時(shí)內(nèi)（依賴各種不同的構(gòu)建手段）分析結(jié)果，常常用到一些報(bào)告基因系統(tǒng)如熒光蛋白，β-半乳糖苷酶等來(lái)幫助檢測(cè)。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染則是外源質(zhì)粒DNA整合到宿主細(xì)胞染色體上，使宿主細(xì)胞可長(zhǎng)期表達(dá)目的基因及蛋白，需要在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染基礎(chǔ)上對(duì)靶細(xì)胞進(jìn)行篩選或者應(yīng)用高轉(zhuǎn)染效率的病毒。建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系時(shí)，需根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的藥物對(duì)靶細(xì)胞進(jìn)行篩選，常見(jiàn)的抗性標(biāo)志物有潮霉素（hygromycin）、嘌呤霉素（puromycin）和新霉素（neomycin）。篩選得到的細(xì)胞能夠穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白，可以用于目的蛋白的擴(kuò)增和富集，或者得到穩(wěn)定沉默特定基因的細(xì)胞株。

二、服務(wù)項(xiàng)目及周期