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當(dāng)前位置:首頁資料下載RAPD分子標(biāo)記的實(shí)驗(yàn)原理及操作流程

RAPD分子標(biāo)記的實(shí)驗(yàn)原理及操作流程

發(fā)布時間:2015/5/5點(diǎn)擊次數(shù):1696

RAPD技術(shù)的全稱是隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA),此技術(shù)建立于PCR基礎(chǔ)之上,使用一系列具有10個左右堿基的單鏈隨機(jī)引物,對基因組的DNA全部進(jìn)行PCR擴(kuò)增,以檢測多態(tài)性。由于整個基因組存在眾多反向重復(fù)序列,因此須對每一隨機(jī)引物單獨(dú)進(jìn)行PCR,單一引物與反向重復(fù)序列結(jié)合,使重復(fù)序列之間的區(qū)域得以擴(kuò)增。引物結(jié)合位點(diǎn)DNA序列的改變以及兩擴(kuò)增位點(diǎn)之間DNA堿基的缺失、插入或置換均可導(dǎo)致擴(kuò)增片段數(shù)目和長度的差異,經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳分離后通過EB染色以檢測DNA的片段的多態(tài)性。

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